Blue Native PAGE

[strengstensgeheim]

Was ist das?
Nach welchem Prinzip trennt diese?
(Warum sind die Proteine blau gefärbt? Heftet sich der Farbstoff an die Proteine?)

[Dr. Markus Funk]

Hallo geheim,

die blue native PAGE (im deutschen auch als Blau-native Elektrophorese bezeichnet) ist eine Methode zur nativen Auftrennung von Proteinkomplexen.
Sie wurde als Alternative zur SDS-PAGE entwickelt.

Der Name "native blue" leitet sich von dem eingesetzten Farbstoff Coomassie Brillant Blue ab. Es handelt sich dabei um einen Triphenylmethanfarbstoff. Dieser bindet an hydrophobe und kationische Bereiche von Proteinen und verleiht ihnen eine netto-negative Ladung

Bei Membranproteinen kann Coomassie Brillant Blue das umgebende Detergens zum Teil ersetzen. Analog zu einer SDS-Gelelektrophorese wandern dann Protein-Farbstoff-(Detergens)-Komplexe im elektrischen Feld zur Anode.

Der Erhalt des nativen Zustands ermöglicht eine Bestimmung des Molekulargewichtes von Proteinkomplexen. Da native Proteinkomplexe deutlich höhere molare Massen als einzelne Proteinuntereinheiten aufweisen, gibt es hierfür spezielle Proteinstandards zur Kalibrierung.

Viele Grüße
Markus Funk

[strengstensgeheim]

Danke, das hat mir in mehrfacher Hinsicht weitergeholfen!